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顯微鏡相關(guān)知識

  • 發(fā)布日期:2020-03-11      瀏覽次數:1956
    • 一、顯微鏡基礎知識 第1章: 顯微鏡史

      隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,人們越來(lái)越需要觀(guān)察微觀(guān)世界,顯微鏡正是這樣的設備,它突破了人類(lèi)的視覺(jué)極限,使之延伸到肉眼無(wú)法看清的細微結構。

      顯微鏡是從十五世紀開(kāi)始發(fā)展起來(lái)。從簡(jiǎn)單的放大鏡的基礎上設計出來(lái)的單透鏡顯微鏡,到結構復雜的復式顯微鏡,以及相差,熒光,偏光,顯微觀(guān)察方式的出現,使之更廣范地應用于醫學(xué),生物學(xué),金屬材料,化工等領(lǐng)域。

      第2章 顯微鏡的基本光學(xué)原理

      . 折射和折射率

      光線(xiàn)在均勻的各向同性介質(zhì)中,兩點(diǎn)之間以直線(xiàn)傳播,當通過(guò)不同密度介質(zhì)的透明物體時(shí), 則發(fā)生折射現象,這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。當與透明物面不垂直的光線(xiàn)由空氣射入透明物體(如玻璃)時(shí),光線(xiàn)在其介面改變了方向,并和法線(xiàn)構成折射角。

      . 透鏡的性能

      透鏡是組成顯微鏡光學(xué)系統的基本的光學(xué)元件,物鏡目鏡及聚光鏡等部件均由單個(gè)和多個(gè)透鏡組成。依其外形的不同,可分為凸透鏡(正透鏡)和凹透鏡(負透鏡)兩大類(lèi)。

      當一束平行于光軸的光線(xiàn)通過(guò)凸透鏡后相交于一點(diǎn),這個(gè)點(diǎn)稱(chēng)"焦點(diǎn)",通過(guò)交點(diǎn)并垂直光軸的平面,稱(chēng)"焦平面"。焦點(diǎn)有兩個(gè),在物方空間的焦點(diǎn),稱(chēng)"物方焦點(diǎn)",該處的焦平面, 稱(chēng)"物方焦平面";反之,在象方空間的焦點(diǎn),稱(chēng)"象方焦點(diǎn)",該處的焦平面,稱(chēng)"象方焦平面 "。

      光線(xiàn)通過(guò)凹透鏡后,成正立虛像,而凸透鏡則成正立實(shí)像。實(shí)像可在屏幕上顯現出來(lái), 而虛像不能。

      . 影響成像的關(guān)鍵因素­相差

      由于客觀(guān)條件,任何光學(xué)系統都不能生成理論上理想的象,各種象差的存在影響了成像質(zhì)量。下面分別簡(jiǎn)要介紹各種相差。

      1. 色差(Chromatic aberration

      色差是透鏡成像的一個(gè)嚴重缺陷,發(fā)生在多色光為光源的情況下,單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅 橙 黃 綠 青 藍 紫 七種組成,各種光的波長(cháng)不同 ,所以在通過(guò)透鏡時(shí)的折射率也不同,這樣物方一個(gè)點(diǎn),在象方則可能形成一個(gè)色斑。

       

      色差一般有位置色差,放大率色差。位置色差使像在任何位置觀(guān)察,都帶有色斑或暈環(huán),使像模糊不清。而放大率色差使像帶有彩色邊緣

      2. 球差(Spherical aberration)

      球差是軸上點(diǎn)的單色相差,是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結果是,一個(gè)點(diǎn)成像后,不在是個(gè)亮點(diǎn),而是一個(gè)中間亮 邊緣逐漸模糊的亮斑。從而影響成像質(zhì)量。

      球差的矯正常利用透鏡組合來(lái)消除,由于凸、凹透鏡的球差是相反的,可選配不同材料的凸凹透鏡膠合起來(lái)給予消除。舊型號顯微鏡,物鏡的球差沒(méi)有*矯正,應與相應的補償目鏡配合,才能達到糾正效果。一般新型顯微鏡的球差*由物鏡消除。

      3. 慧差(Coma)

      慧差屬軸外點(diǎn)的單色相差。軸外物點(diǎn)以大孔徑光束成象時(shí),發(fā)出的光束通過(guò)透鏡后,不再相交一點(diǎn),則一光點(diǎn)的象便會(huì )得到一逗點(diǎn)壯,型如慧星,故稱(chēng)"慧差"。

      4. 象散(Astigmatism

      象散也是影響清晰度的軸外點(diǎn)單色相差。當視場(chǎng)很大時(shí),邊緣上的物點(diǎn)離光軸遠,光束傾斜大,經(jīng)透鏡后則引起象散。象散使原來(lái)的物點(diǎn)在成象后變成兩個(gè)分離并且相互垂直的短線(xiàn), 在理想象平面上綜合后,形成一個(gè)橢圓形的斑點(diǎn)。象散是通過(guò)復雜的透鏡組合來(lái)消除。

      5. 場(chǎng)曲(Curvature of field

      場(chǎng)曲又稱(chēng)"象場(chǎng)彎曲"。當透鏡存在場(chǎng)曲時(shí),整個(gè)光束的交點(diǎn)不與理想象點(diǎn)重合,雖然在每個(gè)特定點(diǎn)都能得到清晰的象點(diǎn),但整個(gè)象平面則是一個(gè)曲面。這樣在鏡檢時(shí)不能同時(shí)看清整個(gè)相面,給觀(guān)察和照相造成困難。因此研究用顯微鏡的物鏡一般都是平場(chǎng)物鏡,這種物鏡已經(jīng)矯正了場(chǎng)曲;。

      6. 畸變(Distortion

      前面所說(shuō)各種相差除場(chǎng)曲外,都影響象的清晰度?;兪橇硪环N性質(zhì)的相差,光束的同心性不受到破壞。因此,不影響象的清晰度,但使象與原物體比,在形狀上造成失真。

      四. 顯微鏡的成象(幾何成象)原理

      顯微鏡之所以能將被檢物體進(jìn)行放大,是通過(guò)透鏡來(lái)實(shí)現的。單透鏡成象具有象差,嚴重影響成象質(zhì)量。因此顯微鏡的主要光學(xué)部件都由透鏡組合而成。從透鏡的性能可知,只有凸透鏡才能起放大作用,而凹透鏡不行。顯微鏡的物鏡與目鏡雖都由透鏡組合而成,但相當于一個(gè)凸透鏡。為便于了解顯微鏡的放大原理,簡(jiǎn)要說(shuō)明一下凸透鏡的5 種成象規律:

      • 當物體位于透鏡物方二倍焦距以外時(shí),則在象方二倍焦距以?xún)?、焦點(diǎn)以外形成縮小的

       

      倒立實(shí)象;

       

      (2) 當物體位于透鏡物方二倍焦距上時(shí),則在象方二倍焦距上形成同樣大小的倒立實(shí)象;

       

      (3) 當物體位于透鏡物方二倍焦距以?xún)?,焦點(diǎn)以外時(shí),則在象方二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)象;

      (4) 當物體位于透鏡物方焦點(diǎn)上時(shí),則象方不能成象;

       

      (5) 當物體位于透鏡物方焦點(diǎn)以?xún)葧r(shí),則象方也無(wú)象的形成,而在透鏡物方的同側比物體遠的位置形成放大的直立虛象。

      顯微鏡的成象原理就是利用上述(3)和(5)的規律把物體放大的。當物體處在物鏡前F­2F

       

      F 為物方焦距之間,則在物鏡象方的二倍焦距以外形成放大的倒立實(shí)象。在顯微鏡的設計上,將此象落在目鏡的一倍焦距F1 之內,使物鏡所放大的次象(中間象,又被目鏡再一次放大,終在目鏡的物方(中間象的同側、人眼的明視距離250mm處形成放大的直立(相對中間象而言虛象。因此,當我們在鏡檢時(shí),通過(guò)目鏡(不另加轉換棱鏡看到的象于原物體的象,方向相反。

      五.顯微鏡光學(xué)系統簡(jiǎn)介

      顯微鏡光學(xué)系統的設計有三種光學(xué)系統。

       

      長(cháng)筒光學(xué)系統

       

      萬(wàn)能無(wú)限遠校正光學(xué)系統:是目前的光路設計,它分體現了無(wú)限遠校正方式的*性。光線(xiàn)通過(guò)物鏡后成為平行光束通過(guò)鏡筒,并在結象透鏡處折射或完成無(wú)相差的中間象。物鏡與觀(guān)察筒內結象透鏡之間可添加光學(xué)附件,而不影響總放大倍數。另外這種光學(xué)系統不需要安裝附加校正透鏡,都能得到較好的顯微圖象。

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